快速核酸檢測黑科技——RPA
面對突如其來的新冠疫情
核酸檢測引來發(fā)展新高潮
尤其在分子診斷領(lǐng)域
傳統(tǒng)核酸分子檢測技術(shù)
不斷蛻變和創(chuàng)新
從未淡出我們的視野
經(jīng)歷了經(jīng)典PCR、實時定量PCR
再到現(xiàn)在的數(shù)字PCR
三個階段
這些都離不開PCR的高溫變性
低溫退火和延伸
離不開精準(zhǔn)控溫的PCR儀
今天小編給你介紹一個黑科技
可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)
--重組酶聚合酶等溫擴增技術(shù)（RPA）
RPA（Recombinase Polymerase Amplification）全稱重組酶聚合酶等溫擴增技術(shù)，被稱為可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)。
RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，最好反應(yīng)溫度在37°C左右。
RPA原理
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動DNA合成，對模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進(jìn)一步替換。在這個體系中，由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進(jìn)行得非?？?，一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。
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